ساخت و ارزیابی داربست ابریشم- کیتوسان به عنوان ابزار کشت سه بعدی سلول های شبه استخوانی

مقدمه: کشت و تکثیر سلول های شبه استخوانی، با هدف استفاده در مطالعات پژوهشی و درمانی همواره از اهمیت زیادی برخوردار است. در این بین، مطالعات نشان داده است که کشت سلول ها در یک محیط سه بعدی با هندسه ی مهندسی شده، در مقایسه با کشت در محیط دو بعدی، اثرات بهتری بر روی سلول ها دارد . هدف از پژوهش حاضر، ساخت و ارزیابی داربستی با ویژگی های مناسب، برای کشت سه بعدی سلول های شبه استخوانی بود. روش ها: داربست ابریشم- کیتوسان به روش خشکاندن انجمادی تهیه گردید. ساختار داربست ها با استفاده از میکروسکوپ الکترونی روبشی بررسی شد. خواص مکانیکی داربست ها توسط تست فشار و تخریب پذیری داربست ها با ارزیابی درصد کاهش وزن آن ها در محلول phosphate buffer salin سنجیده شد. تأثیر جزء ابریشمی داربست بر روی درصد بقای سلولی با استفاده از آزمون mtt [3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide] و چسبندگی سلولی با کشت سلول های شبه استخوانی 63mg بر روی بستر ابریشمی ارزیابی شد. یافته ها: تصاویر میکروسکوپ الکترونی- روبشی، وجود تخلخل های سطحی مناسب برای نفوذ سلول به داخل ساختار داربست و به هم پیوستگی مناسب تخلخل ها برای انتقال متابولیت ها و سیگنال های شیمیایی را نشان داد. متوسط قطر تخلخل های سطحی داربست ها، 75/46 ± 90/200 میکرومتر به دست آمد که این اندازه، در مقایسه با میانگین قطر سلول ها (95 میکرومتر)، بسیار بزرگ تر بود. خواص مکانیکی داربست برای استفاده به عنوان ابزار کشت سه بعدی سلول مناسب بود؛ به طوری که میانگین مدول فشاری داربست ها 8/0 ± 6/0 مگاپاسکال به دست آمد. همچنین، نتایج تست تخریب پذیری نشان داد که میزان تخریب داربست ها با افزایش درصد وزنی جزء کیتوسان افزایش می یابد. نتایج آزمون mtt و کشت سلولی، نشان داد ابریشم استفاده شده در ساختار داربست های کامپوزیتی برای سلول ها سمیت ندارد و سلول ها توانایی چسبیدن به سطح ابریشم را دارند. نتیجه گیری: داربست ابریشم- کیتوسان ساخته شده به روش خشکاندن انجمادی، می تواند ابزاری مناسب برای کشت سه بعدی سلول های شبه استخوانی باشد.